猪蓝耳病TJM-F92株对猪瘟C株没有免疫抑制?

 

 

  PRRSV引起猪只产生哪些病变?

  1、蓝耳病的六大症状:①母猪繁殖障碍:弱仔、流产、早产、死胎、木乃伊(图1);②母猪不发情、发情混乱、不孕不育;③保育猪毛松毛长、高度沉郁;④严重的呼吸道症状、喘气、腹泻;⑤母猪和各阶段猪出现神经症状、共济失调;⑥常与副猪嗜血、喘气病等混合感染,高致病性蓝耳病导致母猪和大猪死亡。

  图1 患病母猪流产

  2、病理变化:患病仔猪出现典型的PRRS病变,肺脏出血严重,水肿、实变(图2-A,B)。肾脏皮质部和髓质部出血严重(图2-C)。扁桃体出血,红肿(图2-D)。脾脏轻度肿大、边缘呈锯齿突起,有出血点,个别有小的梗死灶。肝脏边缘呈暗红色,出血严重。其他病变包括小肠出现卡他性炎症、出血,脑轻度充血,全身性的淋巴结肿大、出血(和颜良,2011)。

 

  图2 患蓝耳病猪只解剖病理变化

  CSFV引起猪只产生哪些病变?

  1、CSFV可引起猪的高热稽留、全身广泛性出血(图3)及母猪繁殖障碍等一系列症状(Moenning, 2000)。其特征是:急性呈败血性变化,实质器官出血,坏死和梗死;慢性呈纤维素性坏死性肠炎,后期常有副伤寒及巴氏杆菌病继发。

 

  图3 患病猪只全身广泛性出血

  2、病理变化:受CSFV感染仔猪的各脏器均出现了不同程度的病变。肺部以不同程度的出血、实变、水肿为主(图4-A、B)。肾脏包膜下有暗紫红色小点状出血,肾皮质和髓质均有出血(图4-C);扁桃体出血,坏死,部分地方出现溃烂(图4-D)。淋巴结肿胀,外观呈深红色,被膜暗红的并有出血点;脾脏边缘出现坏死性病灶(和颜良,2011)。

  

  图4 患猪瘟猪只解剖病理变化

  然而,有研究表明,PRRSV感染后能够抑制机体对其他病原的免疫反应。PRRSV感染可明显抑制猪瘟疫苗的免疫应答(Li and Yang, 2003; Suradhat et al., 2006)。更有研究发现,如果在猪瘟疫苗免疫前一周给猪接种PRRSV,会显著抑制CSF抗体的产生(Suradhat et al., 2006)。因此,研制出一种安全、有效且对其它病原没有干扰的PRRSV疫苗尤为重要。

  基于此,中国农业科学院武华博士课题组进行了PRRSV TJM-F92毒株对猪瘟病毒(CSFV)C株是否存在免疫干扰作用的研究。

  为什么选择TJM-F92毒株?

  武华博士课题组自2006年至2010年从我国北方部分省市采集疑似高热病的病死猪病料,在Marc-145细胞上进行病毒分离,共分离到6株病毒,经鉴定均为美洲型PRRSV,与JXA1和HUN4等HP-PRRSV株全长及各片段长度完全一致,且在NSP区段第481位及533~561位均出现不连续30个氨基酸的缺失。通过对传代致弱过程中不同代次的病毒进行全基因序列分析,结果显示,我们将PRRSV TJ株在Marc-145上连续传代弱化,每隔5~10代进行蚀斑克隆纯化至F19时,筛选到一株在NSP基因上除存在不连续30个氨基酸缺失的同时还存在一段连续缺失120个氨基酸的毒株(图5)。在进行PRRSV活疫苗研制过程中,通过蚀斑克隆纯化筛选获得的一株致弱毒株并传代后,即PRRSV TJM-F92株。该毒株与同期研制的其它HP-PRRSV活疫苗相比,具有病毒血症持续时间短,病毒血症载毒量低,散毒能力差,同居不易感染,无毒力返强趋势,安全性优良,同时具有优良的保护效力等特点。

 

  图5 TJM-F92相较HP毒株有360个核苷酸自然缺失

  TJM-F92毒株是否存在免疫抑制?

  在进行PRRSV TJM-F92株活疫苗研制过程中,课题组进行了PRRSV TJM-F92株对CSFV C株免疫干扰研究的预试验,结果初步表明,PRRSV TJM-F92株与CSFV C株同时免疫,前者对后者无免疫抑制作用。

  随后又开展了单剂量PRRSV TJM-F92株对单剂量CSFV C株的免疫干扰研究,分别从体液免疫、细胞免疫、免疫攻毒、病理变化等方面进行了详细研究。结果表明,PRRSV TJM-F92株与CSFV C株二联免疫组仔猪在抗体水平、白细胞数量变化以及T细胞亚群含量等方面与两个单苗免疫组无明显差异,说明免疫期间,PRRSV TJM-F92株没有影响CSFV C株的免疫应答。免疫28天后攻击PRRSV TJ株强毒结果表明,二联免疫组与PRRSV TJMF92株单独免疫组仔猪,均未出现PRRS典型临床症状,两组免疫组在抗体水平、白细胞数量、T细胞亚群比例等方面均无明显差异。PRRSV阴性对照组仔猪的白细胞数量与免疫组仔猪白细胞数量相比明显下降,差异显著。

  攻毒后免疫组仔猪完全保护,PRRSV阴性对照组仔猪死亡率达80%。攻击CSFV石门系血毒结果表明,二联免疫组与CSFV C株单独免疫组仔猪,均未出现CSF典型的临床症状,两组试验动物在抗体水平、白细胞数量、T细胞亚群比例变化方面无明显差异。CSFV阴性对照动物均出现了CSF典型的临床症状,死亡率高达100%,阴性对照组仔猪CD3+和CD4+T细胞亚群的数量在感染过程中均出现了明显的降低。该研究结果表明,同时免疫PRRSV TJM-F92株疫苗株与CSFV C株疫苗株,PRRSV TJM-F92株不会抑制机体对CSFV C株的免疫应答,试验同时表明,CSFV C株也不干扰PRRSV TJM-F92株疫苗的免疫效果(和彦良,2011)。

  本研究还设计应用高剂量PRRSV TJM-F92株(106.0TCID50)对低剂量CSFV C株(101.0FAID50)的免疫干扰研究,其中PRRSV TJM-F92株使用的剂量为10倍使用剂量(106.0TCID50),CSFV C株使用剂量仅为101.0FAID50,相当于CSFV C株最小免疫剂量,并同时设计CSFV C株低剂量免疫对照组和CSFV C株阴性对照组,分别从体液免疫、免疫攻毒保护及病理学变化等方面进一步评价PRRSV TJM-F92株对CSFVC株是否存在免疫干扰作用。试验结果表明,高剂量PRRSV TJM-F92株与低剂量CSFV C株免疫组在体液免疫、攻毒保护与病理学变化等方面与低剂量CSFV C株免疫组均无显著差异。

  总而言之,应用传统方法制备的PRRSV活疫苗,很难改变PRRSV的免疫抑制性。临床上通过将PRRSV活疫苗与其它活疫苗进行间隔免疫来降低PRRSV活苗对其它活疫苗的免疫干扰。然而,值得一提的是,武华博士课题组经过大量试验证明,PRRSV TJM-F92株是一株安全有效的疫苗株,与CSFV C株活疫苗同时免疫,对CSFV C株无免疫干扰作用。

[责任编辑:猪小妹 ]
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猪蓝耳病,免疫抑制,猪瘟C株,猪蓝耳病TJM-F92株

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